质粒载体的三要素
用于克隆表达的质粒载体通常涉及的三要素:
1.复制子:又称复制起始区,包含控制质粒DNA复制起点和质粒拷贝数等遗传因素。
复制子可分为为:①严谨型复制子②松弛型复制子。
2.选择标记:由质粒编码的选择标记赋予宿主细胞新的表型,用于鉴定和筛选转化有质粒的宿主细胞。最常见的选择标记为抗生素抗性基因,包括:氨苄西林、氯霉素、卡那霉素、新霉素
3.多克隆位点:
质粒是小型环状DNA分子,在基因工程中作为最常用,最简单的载体,必须包括三部分:遗传标记基因,复制区,目的基因。
质粒作为载体的条件
质粒是小型环状DNA分子,在基因工程中作为最常用,最简单的载体。
质粒作为载体的条件有:
1、具有复制起始点。
2、具有两种以上易被检测的选择性标记。
3、在选择标记上具有多种限制酶的单一切点。
4、具有尽可能小的相对分子质量。
5、应属于松弛复制型。
6、应为非传递性质粒理想值粒载体例子。