李坏死环斑病毒病是怎样检验与检疫的？
鉴别寄主：欧洲甜樱桃（F12/1）实生苗：嫁接接种当年春季，叶片产生坏死叶斑和褪绿环斑。山樱桃Prunusserrulatacv.Shirofugen：芽接2～3周后，在带有病毒的接芽或皮周围组织出现深褐色的坏死和流胶。桃实生苗（GF305）：在温室条件下接种后3周后，叶片产生黄色环斑。强毒株系在叶片上产生坏死、褪绿或环斑，以后新梢坏死。黄瓜：接种1～5d后，子叶产生边缘不清的或环状的褪绿斑，6～8d后顶芽枯死、植株矮缩。昆诺藜：接种5～6d后，产生褪绿环斑、灰色坏死斑，接种和新生叶片畸形。瓜尔豆：局部暗色病斑，系统性脉坏死。胶苦瓜：接种叶产生灰色坏死病斑，偶尔出现系统性坏死。枯斑寄主：笋瓜（品种Buttercup、Shorokikuza、Shirokawasato）接种叶表现黄萎环斑症状。体外稳定性：①钝化温度。55～62℃。②稀释终点。10-2。③体外存活期。16～18h。血清学检验：ELISA法是目前最常用的血清学检测方法。春季新发嫩枝叶片和花瓣检测效果最好。秋冬季节休眠枝条的皮部也是很好的检测材料。PNRSV与丹麦李线纹斑病毒Denmarkplumlinepatternvirus血清学关系密切，但与卡通李线纹斑病毒Cation’sShiroplumlinepatternvirus无血清学关系。与玫瑰花叶病毒、苹果花叶病毒血清学关系较远，与洋李矮缩病毒之间无血清学交叉反应。分子生物学检测：采用分子杂交技术可成功检测不同血清型的PNRSV。目前已报道了PNRSV多个分离物的核苷酸序列，因此可设计特异引物对该病毒进行PCR检测。可用的PCR方法很多，包括常规的反转录PCR（RT-PCR）以及在此基础上改进的免疫捕捉反转录PCR（IC-RT-PCR）。Helguera等（2001）在以上PCR扩增片段的内部加入一对引物，采用巢式IC-RT-PCR技术检测PNRSV，比常规的IC-RT-PCR检测灵敏度提高了100倍。PNRSV的分子变异较大，有多个株系和血清型。有人通过比较不同分离物的基因组序列设计特异性引物，采用PCR技术不仅可对该病毒进行检测，还可鉴别特定的株系或血清型。如Hammond（1999）设计了通用型引物和株系专化型引物，运用多重PCR的方法，建立了一种快速检测和区分株系的新方法。株系的区分，特别是对强毒株系的鉴定在检疫检验中非常重要。危险性评价：本病的病原体李坏死环斑病毒，可通过苹果、桃、杏、樱桃、洋李、啤酒花的繁殖材料及欧洲甜樱桃、欧洲酸樱桃、马哈利酸樱桃、洋李、油桃、覆盆子和笋瓜的种子进行远距离传播。除危害苹果、桃、杏、樱桃、洋李、啤酒花、蔷薇等木本植物外，还可侵染棉花、烟草、西瓜、甜瓜、南瓜、西葫芦、菜豆、豇豆、向日葵、莴苣、草木樨等草本植物，并可经Vasatesfockeui和Longidorusmacrosoma在田间传播扩大蔓延。对这些果树和作物的生产构成重大经济损失。季良在进行危险性评价时，危险度值10分，定为高危检疫性有害生物。国内虽有局部发生，鉴于其危害的严重性，我国已列入进境植物检疫危险性有害生物名单。地理分布：广泛分布于温带地区，在澳大利亚、奥地利、比利时、保加利亚、加拿大、捷克、斯洛伐克、丹麦、法国、德国、英国、匈牙利、印度、以色列、瑞典、意大利、波兰、荷兰、墨西哥、新西兰、挪威、葡萄牙、罗马尼亚、南非、西班牙、瑞士、美国、前苏联和南斯拉夫等国家均有发生。我国部分地区的樱桃上也由该病毒侵染。检疫国家地区：中国、阿根廷、巴拉圭、巴西、荷兰、秘鲁、斯洛伐克、匈牙利、澳大利亚、印度尼西亚、秘鲁、英国、法国、意大利、阿尔及利亚、冰岛、摩洛哥、斯洛伐克等。应检植物：苹果、桃、杏、樱桃、洋李的繁殖材料，樱桃、洋李、油桃、覆盆子和笋瓜的种子。检疫措施：进口时须经省植物检疫机构审批，限量进口不得超过100株，并要求附有出口国《检疫证书》，保证不带此类病毒。入境后须在当地植物检疫机构监督下，经一年以上生育期的隔离检验，确认无病者，才允许用于繁殖或生产种植。
李美珊的人物评价
李美珊在美国生活多年，她的夺冠从一定层面上来说也是对东方传统的含蓄、窈窕淑女等传统审美观的一种冲击，因为李美珊不仅身材高大丰满，而且个性和谈吐都十分率直。她不用故做高傲，就能使人感受到一种压力，一种自叹弗如的自卑感。也许正是这种高贵的具有侵略性的气质促成了她成为当年的港姐冠军。但是令人较为遗憾的是，李美珊并没有真正走进娱乐圈，更没有出演过任何一部电影。因此，在港姐与香港电影的叙述中，也无法为她更多地着墨。
李坏死环斑病毒病的理化性质是什么？
病毒名称：李坏死环斑病毒Prunusnecroticringspotvirus（PNRSV）。分类地位：等轴不稳环斑病毒属Ilarvirus，雀麦花叶病毒科Bromoviridae。在国际病毒分类委员会（ICTV）中的编码为00.010.0.02.015。病毒异名：欧洲酸樱桃坏死环斑病毒Sourcherrynecroticringspotvirus。病毒提纯：用含有2-巯基乙醇和二乙基二硫代氨基甲酸酯钠Na-diethyldithiocarbamate的磷酸盐缓冲液（0.02mol/L，pH8.0）匀浆感病的黄瓜子叶，低速离心，上清液用0.8倍体积的含水磷酸钙处理。磷酸盐缓冲液悬浮沉淀，并用柠檬酸调到pH4.8～5.0，离心除去沉淀。上清液调到pH7.0，再次超高速离心。可以用蔗糖梯度离心，电泳进一步纯化病毒（Fulton，1970）。病毒理化特性：①病毒粒子。球状，有两种粒子，直径22～23nm，分子质量5.2*106～7.3*106，沉降系数为72S（T），90S（M），95S（B），A260/A280=1.56。②核酸。核酸含量16%，4组分（RNA1，2，3，and4）G∶A∶C∶U=27∶25∶21∶27。全基因组大小为8056nt。③蛋白。蛋白含量84%，分子质量25ku，有196个氨基酸残基。病毒株系：李坏死环斑病毒有多个株系，主要是依据其草本寄主植物范围或症状表现而划分的。普通株系能系统性侵染菜豆（Phaseolusvulgaris）和豇豆（Vignasinensis），其他株系则不能。丹麦李线纹株系和苹果花叶血清型能在李子上产生线纹型症状。也有人根据不同分离物间的血清学反应分为不同血清型。PNRSV不同分离物的致病性差异较大，根据引起症状的差异可划分为强毒和弱毒等不同致病型。Hammond（2003）对68个不同PNRSV分离株的CP基因进行序列比较，发现序列特征与致病型和血清型之间有一定联系，并将PNRSV划分为3个不同的群：Ⅰ（PV32）、Ⅱ（PV96）和Ⅲ（PE-5）。其中Ⅰ（PV32）主要由强毒株系组成，其血清型为CH9；Ⅱ（PV96）主要由非强毒株系组成，其血清型为CH9；Ⅲ（PE-5）包含部分强毒株系和部分非强毒株系，血清型主要为CH3和CH30。其他：洋李矮缩病毒引起的酸樱桃休克症状，很像李坏死环斑病毒所引起的症状，但一般较轻，只发现在未展开的和部分展开的叶片上；而李坏死环斑病毒，引起的症状出现在未展开的小叶片上。
