反相色谱

时间:2023-07-09 08:03:53编辑:分享君
什么是反相色谱

1、反相色谱是一反普通气相色谱的测定方式。

2、以被测的高分子为固定相、以惰性气体为流动相,为了测定需要,在流动相中加入一些探针分子,它们是挥发性的低分子。

4、将探针分子注入气化室气化后,由载气带入色谱柱,测定它们在两相中的分配,从而研究高分产的各种性质,高分子与探针分子的相互作用以及高分子与高分子间的相互作用。

反相色谱柱原理

1、反相色谱柱的原理:萊垍頭條

2、反相色谱柱是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。

3、与HIC一样,RPC中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面,但是,RPC固定相表面完全被非极性基团所覆盖,表现出强烈的疏水性。

4、因此,必须用极性有机溶剂(如甲醇、乙腈等)或其水溶液进行溶质的洗脱分离。

反向纸色谱原理

1、原理條萊垍頭

2、反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。

3、与HIC一样,RPC中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面,但是,RPC固定相表面完全被非极性基团所覆盖,表现出强烈的疏水性。

4、因此,必须用极性有机溶剂(如甲醇、乙腈等)或其水溶液进行溶质的洗脱分离。

6、溶质在反相介质上的分配系数取决于溶质的疏水性,一般疏水性越大,分配系数越大。

7、当固定相一定时,可以通过调节流动相的组成调整溶质的分配系数。

8、RPC主要应用于相对分子质量低于5000,特别是1000以下的非极性小分子物质的分析和纯化,也可以用于蛋白质等生物大分子的分析和纯化。

9、由于反相介质表面为强烈疏水性,并且流动相为低极性的有机溶剂,生物活性大分子在RPC分离过程中容易变性失活,所以,以回收生物活性蛋白质为目的时,应注意选用适宜的反相介质。

11、反相介质的商品种类繁多,其中最具代表性的是以硅胶为载体,通过表面键合非极性分子层制备。

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